名  稱

主要成分及配制

應    用

原     理

注 意 事 項

碘液

KI、I₂

 

配制：將2g碘化鉀放入5ml蒸餾水中，加熱溶解后再加入1g碘，加蒸餾水稀釋至300ml）

1“光合作用”實驗中，用于鑒定淀粉的生成（教材第一冊P52）；

2“溫度對酶活性的影響”實驗中，用于鑒定淀粉是否分解（教材第三冊P8）。

多數(shù)淀粉是由20%~25%的直鏈淀粉和75%~80%的支鏈淀粉組成。直鏈淀粉借助分子內部的氫鏈卷曲成螺旋狀。I₂會嵌入到螺旋結構的空隙處，并形成一種穩(wěn)定的淀粉—碘絡合物。這種淀粉—碘絡合物能夠比較均勻地吸收除了藍光以外的長波光，從而使淀粉呈現(xiàn)藍色。

1直鏈淀粉初步水解得到的糊精分子仍較大，遇碘顯藍色，繼續(xù)水解得分子較小的糊精，遇碘顯紅色，再水解變成分子更小的無色糊精，遇碘不顯色。

2支鏈淀粉遇碘產(chǎn)生紫紅色。

雙縮脲試劑

A液：2ml質量濃度0.1g/mlN_aOH；

 

B液：3~4滴質量濃度0.01g/mlC_USO₄

在“生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定”實驗中，作為鑒定生物組織中蛋白質的存在（教材第一冊P17）。

在濃堿溶液中，雙縮脲（NH₂—CO—NH—CO—NH₂）與硫酸銅結合生成紫色或紫紅色的復合物。

蛋白質分子中含有多個與雙縮脲結構類似的肽鍵。

1使用時先加入A液搖勻后，再加入B液。

2凡有兩個或兩個以上的肽鍵結構的化合物都有此反應，故也可用于鑒定肽的存在。

二苯胺

A液：1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中，再加1.5ml濃硫酸，用棕色瓶保存。

 

B液：乙醛的體積分數(shù)為0.2%的溶液。

 

配制：將0.1mlB液加入到10mlA液中，現(xiàn)配現(xiàn)用。

在“DNA的粗提取與鑒定” 實驗中，作為鑒定DNA的試劑（教材第二冊P6）。

DNA中嘌呤核苷酸上的脫氧核糖遇酸生成ω—羥基—γ酮基戊醛，它再和二苯胺作用而顯現(xiàn)藍色（液體呈淺藍色）。鑒定時溶液藍色的深淺與溶液中DNA含量有關。

可用于鑒定脫氧核糖、脫氧核糖核苷酸的存在。

伊紅美藍

伊紅；美藍

用以鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌（教材第三冊P80~81）。

大腸桿菌代謝產(chǎn)物（有機酸）可與伊紅和美藍結合，使菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。

一般加入培養(yǎng)基中，做成鑒定培養(yǎng)基。

斐林試劑

甲液：2ml質量濃度0.1g/mlN_aOH；

 

乙液：4~5滴質量濃度0.05g/mlC_USO₄。

 

配制：將4~5滴乙液滴入2ml甲液，配制而成。

1在“生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定”實驗中，作為鑒定生物組織中還原糖的存在（教材第一冊P17）。

2在“探索淀粉酶對淀粉和蔗糖的作用”實驗中，作為判斷淀粉、蔗糖是否水解的指示劑（教材第一冊P47）。

N_aOH與C_USO₄混合后，立即生成淡藍色的C_U(OH)₂沉淀，C_U(OH)₂與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的C_U2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。

用斐林試劑鑒定還原性糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色→棕色→磚紅色。

斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需分別配制儲存，使用時再臨時混合。

班氏試劑

檸檬酸鈉、無水碳酸鈉、CuSO₄

 

配制：取檸檬酸鈉86.5g和無水碳酸鈉50g放入1000ml錐形瓶中，加水350ml，加熱溶解。另取100ml錐形瓶加入硫酸銅8.65g，加水約50ml，加熱溶解。待兩者冷卻至室溫，將硫酸銅溶液慢慢倒入前液，同時攪勻，并補足水量至500ml。

在“尿糖的測定” 實驗中，作為測定尿糖含量的指示劑（教材第三冊P12）。

硫酸銅與硫酸鈉和檸檬酸鈉相遇，能產(chǎn)生出一種可溶性的又能離解出Cu²⁺的可溶性絡鹽，即檸檬酸鈉此時能防止氫氧化銅沉淀的形成，做了一種親水性掩蔽絡合物形成劑。當利用班氏試劑測定還原性糖時，還原性糖在這種堿性溶液中能將Cu²⁺還原為Cu⁺，Cu⁺ 再與OH^-合成黃色的CuOH，加熱后 CuOH即變成磚紅色的Cu₂O沉淀。

班氏試劑較穩(wěn)定，配制好以后可較長時間保存。

龍膽紫

龍膽紫

 

配制：將龍膽紫溶解在質量分數(shù)為2%的醋酸溶液中配制而成。

在“觀察植物細胞有絲分裂” 實驗中用以著色染色體（教材第一冊P39）。

堿性染料容易讓染色體（質）著色。

染色時間不能過長。

醋酸洋紅

醋酸、洋紅

 

配制：45%醋酸100ml，加洋紅1g，煮沸（沸騰時間不超過30秒），冷卻后過濾即成。

在“觀察植物細胞有絲分裂” 實驗中用以著色染色體（教材第一冊P39）。

堿性染料容易讓染色體（質）著色。

染色時間不能過長。

結晶紫

結晶紫

 

配制：將2g結晶紫溶于20ml體積分數(shù)為95%的酒精。

在“自生固氮菌的分離（選做）” 實驗中用以給細菌著色（教材第三冊P91）。

細菌細胞通常帶負電荷，結晶紫染液是一種鹽，電離時染料離子帶正電，易與帶負電荷的細菌結合而使細菌成紫色，易于在顯微鏡下進行觀察。

染色時間不能過長，否則染色過深，不易觀察細菌結構。

蘇丹Ⅲ

蘇丹Ⅲ

 

配制：將0.1g蘇丹Ⅲ干粉溶于100ml體積分數(shù)為95%酒精中，待全部溶解后再使用。

在“生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定”實驗中，作為鑒定生物組織中脂肪的存在（教材第一冊P17）。

蘇丹Ⅲ遇脂肪顯橘黃色。

染色時間為2~3分鐘。

蘇丹Ⅳ

蘇丹Ⅳ

 

配制：將0.1g蘇丹Ⅳ干粉溶于50ml丙酮中，再加入體積分數(shù)為70%的酒精50ml，充分混合后即可使用。

在“生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定”實驗中，作為鑒定生物組織中脂肪的存在（教材第一冊P17）。

蘇丹Ⅳ遇脂肪顯紅色。

蘇丹Ⅳ染液與脂肪的親和力比較強，所以染色時間應比較短，一般為1分鐘左右。

亞甲基藍

亞甲基藍

1細胞的活體染色劑；

2水污染程度指示劑；

3氧氣檢測劑。

1一種藍色染料，0.01%亞甲基藍對細胞無毒害；

2亞甲基藍（一種有機物小分子）在水中離解成亞甲基藍的陽離子（呈藍色）和氯離子（呈無色），亞甲基藍陽離子可通過主動運輸進入到細菌體內，在酶的作用下被細菌分解成無色的小分子，使藍色褪去，褪色程度越大，說明細菌越多，水污染越嚴重。

3亞甲基藍是氧化還原指示劑，在有氧的環(huán)境中藍色褪去。